熒光檢測(cè)儀是一種能夠測(cè)量樣品中熒光強(qiáng)度的儀器。它廣泛應(yīng)用于生化、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。本文將介紹熒光檢測(cè)儀的使用方法及其原理。
一、熒光檢測(cè)儀的使用方法
1.準(zhǔn)備樣品
樣品種類(lèi)多樣,其準(zhǔn)備方法也各不相同。例如,對(duì)于熒光染料溶液,應(yīng)該在暗室中制備,并且需要避光保存。對(duì)于細(xì)胞和組織樣品,應(yīng)該使用特定的生長(zhǎng)培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)處理。
2.調(diào)節(jié)檢測(cè)儀器
熒光檢測(cè)儀的使用必須按照其使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。通常來(lái)講,需要對(duì)儀器進(jìn)行參數(shù)調(diào)節(jié),如:激發(fā)波長(zhǎng)、檢測(cè)波長(zhǎng)、熒光亮度等參數(shù)的設(shè)置。
3.加載樣品
將準(zhǔn)備好的樣品加入熒光檢測(cè)儀中。在進(jìn)行操作前應(yīng)該注意避免外部干擾光線(xiàn)的入侵,為了確保測(cè)試精度,最好在黑暗條件下進(jìn)行。
4.開(kāi)始測(cè)試
調(diào)節(jié)好參數(shù)和樣品后,按照具體的測(cè)試需求進(jìn)行開(kāi)始熒光檢測(cè)。一般來(lái)說(shuō),樣品熒光產(chǎn)生的強(qiáng)度和波長(zhǎng)能夠反應(yīng)出樣品的物質(zhì)性質(zhì),可以據(jù)此進(jìn)行進(jìn)一步的研究和分析。
二、熒光檢測(cè)儀的原理
熒光檢測(cè)儀采用熒光物質(zhì)熒光素為檢測(cè)依據(jù),其原理是在有外部刺激光(激發(fā)光)的情況下,熒光物質(zhì)分子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),儲(chǔ)存能量。隨著外部刺激光的停止作用,熒光物質(zhì)分子回到基態(tài),熒光素分子釋放能量發(fā)出熒光信號(hào)。不同的熒光信號(hào)是由于熒光物質(zhì)分子的不同躍遷引起的。熒光物質(zhì)分子躍遷后大部分發(fā)生無(wú)輻射躍遷,并且熒光信號(hào)只有一小部分從分子輻射出帶電荷的激子,所以熒光信號(hào)的強(qiáng)度非常弱。
熒光檢測(cè)儀在檢測(cè)過(guò)程中必須使用一個(gè)特殊的熒光濾光片來(lái)過(guò)濾掉外部光線(xiàn)干擾,用于采集數(shù)據(jù)的光就是熒光濾光片通過(guò)的光。
熒光檢測(cè)儀還具有靈敏度高、可重復(fù)性強(qiáng)等特點(diǎn)。其可以測(cè)量到非常微小的熒光強(qiáng)度變化,以及在相同條件下的重復(fù)性數(shù)據(jù)。由于熒光檢測(cè)技術(shù)具有其他傳統(tǒng)檢測(cè)方法無(wú)法比擬的優(yōu)點(diǎn),因此廣泛應(yīng)用于疾病診斷、藥物研究等領(lǐng)域。
熒光檢測(cè)儀的使用方法和原理十分重要,需要我們?cè)趯?shí)際操作過(guò)程中進(jìn)行細(xì)致的調(diào)節(jié)和使用,才能得出精確且可靠的檢測(cè)結(jié)果。