一、檢測(cè)原理
在一定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下,膽堿酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物(碘化硫代乙酰膽堿ATCI或碘化硫代丁酰膽堿BTCI)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑(二硫代二硝基苯甲酸DTNB)發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計(jì)或農(nóng)殘測(cè)試儀在412nm處測(cè)定吸光度的變化值(△A),計(jì)算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的存在。
對(duì)于酶抑制率法來(lái)說(shuō),膽堿酯酶制劑是最為關(guān)鍵的因素,其質(zhì)量技術(shù)水平?jīng)Q定了檢測(cè)的靈敏度、穩(wěn)定性和可靠性。膽堿酯酶制劑的研發(fā)工作一直是本公司的重點(diǎn),我們研究了大量的酶源材料,在提取方法和保持酶活性穩(wěn)定技術(shù)等方面也積累了豐富的經(jīng)驗(yàn),是目前國(guó)內(nèi)唯一可以根據(jù)客戶需求,生產(chǎn)不同靈敏度和活性的液體酶制劑的生產(chǎn)廠家,產(chǎn)量和質(zhì)量都一直處于國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平。
通用于國(guó)內(nèi)酶抑制率法---農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀(分光光度法)500份/盒包裝規(guī)格如下:緩 沖 劑 10包 每包加500mL蒸餾水或純凈水溶解
常溫存放膽堿酯酶 10瓶 不用配制,直接取用 4℃冰箱保存 每份加100μL顯 色 劑 2瓶 加25mL緩沖液溶解 4℃冰箱保存 每份加100μL底 物 4瓶 加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解 4℃冰箱保存 每份加100μL
或者加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解 4℃冰箱保 每份加20μL酶 活 力 空白對(duì)照1分鐘吸光度變化值(ΔΑ0)在0.15-0.3之間。使用方法:請(qǐng)按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T 5009.199-2003操作,或根據(jù)農(nóng)藥殘留測(cè)試儀的使用說(shuō)明進(jìn)行測(cè)試。
結(jié)果判定 以分光光度計(jì)測(cè)試(412 nm波長(zhǎng))時(shí),按下式計(jì)算抑制率: 抑制率(%)=[(ΔΑ0-ΔΑt )/ΔΑ0]×100
二、檢測(cè)靈敏度
我們用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液對(duì)農(nóng)殘速測(cè)試劑的最低檢測(cè)限進(jìn)行了多次測(cè)試,并通過(guò)了中國(guó)廣州分析測(cè)試中心和農(nóng)業(yè)部蔬菜水果質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(廣州)等專業(yè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的檢測(cè)驗(yàn)證。農(nóng)藥名稱 最低檢測(cè)限 農(nóng)藥名稱 最低檢測(cè)限 農(nóng)藥名稱 最低檢測(cè)限 敵敵畏 0.01 毒死蜱 0.5 滅多威 0.1 好年冬 0.05 馬拉硫磷 0.5 敵百蟲(chóng) 0.1 辛硫磷 0.1 樂(lè)果 1.0 呋喃丹 0.05 甲胺磷 0.2 氧化樂(lè)果 0.6 對(duì)硫磷 0.4